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基礎信息Product information
產品名稱:

人外周血樹突狀細胞(未成熟DC細胞)

產品簡介:

人外周血樹突狀細胞(未成熟DC細胞)公司正在出售的產品:小鼠腎小管上皮細胞 人毛囊干細胞 LIX1抗體 小鼠軟骨細胞 有絲分裂著絲粒相關驅動蛋白抗體 小鼠肝非實質細胞 KIAA2013蛋白抗體 RT4-D6P2T大鼠神經鞘瘤細胞

產品型號:

廠商性質:經銷商

訪問量:1202

更新時間:2025-04-09

產品特性Product characteristics

人外周血樹突狀細胞(未成熟DC細胞)

人外周血樹突狀細胞(未成熟DC細胞)

商品屬性:

組織來源

產品規格

細胞形態

貨號

外周血

5×105cells/T25細胞培養瓶

圓形、梭形、多角形,形態多樣

YS-01X8307

細胞簡介:

人外周血DC分離自外周血,由外周血單核細胞誘導而成的;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。樹突狀細胞分為成熟樹突狀細胞和未 成熟樹突狀細胞,典型的未成熟樹突狀細胞呈半貼壁生長,在GM- CSFIL4的作用下形成葡萄串樣集落,細胞大而形態不規則,表面皺褶多,亦可見少量短刺狀突,胞內細胞器豐富并可見吞噬泡,具有較強的遷移能力,伴隨有部分未誘導成的單核細胞,貼壁形態多樣。而成熟的樹突狀細胞由未成熟DC進一步經TNFα、LPS等誘導而成,多數呈懸浮生長, 細胞呈圓形,細胞體積進一步增大,表面大量粗細不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ),伴隨少量貼壁未成熟細胞或者單核細胞。未成熟DC細胞長時間培養也可能導致自發分化成熟。DC細胞尚無特異性細胞表面分子標志,主要通過形態學、組合性細胞表面標志、在混合淋巴細胞反應中能激活初始T細胞等特征進行鑒定。其中成熟樹突狀細胞表面高表達主要組織相容性復合物(MHC)以及CD80CD86等共刺激分子,進而激活T淋巴細胞,誘導免疫應答,處于啟動、調控、并維持免疫應答的中心環節;未成熟樹突狀細胞具有很強的抗原攝取加工能力,但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細胞活化、增殖產生免疫應 答,不能激活T細胞的第二信號,可導致T細胞無能,從而誘導免疫低反應或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細胞表面CD80CD86MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達較低,一般在30%以下。

原代細胞的培養條件:

  一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養

  1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;

  3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;

  7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。

  二、懸浮細胞培養

  1、原代培養時要盡量去除紅細胞;

  2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;

  3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;

  4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;

  5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。

方法簡介:

實驗室分離的人外周血未成熟DC采用密度梯度離心法分離外周血單個核細胞、培養過程添加細胞因子誘導而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測:

實驗室分離的人外周血樹突狀(未成熟DC細胞)CD86免疫熒光鑒定、 細 胞形態等綜合鑒定,純度可達80%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息:

培養基:含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:半貼壁半懸浮

細胞形態:圓形、梭形、多角形,形態多樣

傳代特性:屬于高度分化細胞;屬于不增殖細胞群

消化液:0.25%

培養條件:氣相:空氣,95%CO25%

人外周血樹突狀(未成熟DC細胞)體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。

人外周血樹突狀細胞(未成熟DC細胞)

細胞傳代及凍存:

細胞傳代步驟細胞凍存步驟
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細胞的培養方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養法

  組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

  ② 消化培養法

  ③ 懸浮細胞培養法

  對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

  ④器官培養

  器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。

人外周血樹突狀細胞(未成熟DC細胞)


公司正在出售的產品:

鹽酸甜菜堿   100g

Betaine,Hydrochloride   500g

BEZ235 (NVP-BEZ235)   50mg

BEZ235(NVP-BEZ235)   100mg

鴨γ干擾素(IFN-γ)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human neuronal nuclear aibody type 2 / ai Ri aibody (ANNA-2/Ri) ELISA Kit 人抗神經元核抗體2/Ri抗體(ANNA-2/Ri)試劑盒

Humanhemeoxygenase2,HO-2ELISAKit 人血紅素氧合酶2(HO-2)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforAChE(HumanAcetylcholinesterase)ELISAKit人乙酰酯酶

藥片抗壞血酸比色法定量試劑盒20

MousePhospholipidaseA2,PL-A2ELISAKit小鼠0脂酶A2(PL-A2)試劑盒規格:96T/48T

NADH復合體1抗體

髓過氧化物酶抗體

OLR1重組大鼠 OLR1 / LOX1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

EAAT3(Excitatory amino acid transporters 3 0.5mgEAAT3(Excitatory amino acid transporters 3) 膠質細胞谷運載蛋白3抗原

SRPK3重組人 STK23 / MSSK1 / SRPK3 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

CANT1 Protein Human 重組人 CANT1 蛋白

CRP Protein Mouse 重組小鼠 CRP / C-Reactive 蛋白

EAAT3(Excitatory amino acid transporters 3 0.5mgEAAT3(Excitatory amino acid transporters 3) 膠質細胞谷運載蛋白3抗原

CANT1 Protein Human 重組人 CANT1 蛋白

OLR1重組大鼠 OLR1 / LOX1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CRP Protein Mouse 重組小鼠 CRP / C-Reactive 蛋白

SRPK3重組人 STK23 / MSSK1 / SRPK3 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

人外周血樹突狀細胞(未成熟DC細胞)大鼠δ基乙酰脫水酶(ALAD)試劑盒 ,英文名: ALAD ELISA Kit

Rabbit ai neuophil granules aibody (ANGA) ELISA Kit 兔子抗中性粒細胞顆粒抗體(ANGA)試劑盒

ELISA 小鼠巨噬細胞游走抑制因子(mouse MIF)  進口分裝

CLIAKitforIL-1sRI(Rabbitsolubleierleukin-1receptorI)ELISAKit兔子白介素1可溶性受體I

通用型辣椒輕斑駁病毒(PepperMildMottleVirus;PMMV)試劑盒20

ELISAKitTM大鼠血栓調節蛋白


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