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原來這就是活化素Aelisa試劑盒的測定步驟
日期：2022-03-29瀏覽：970次
活化素Aelisa試劑盒檢測目的：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被人心型脂肪酸結(jié)合蛋白（h-FABP）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人心型脂肪酸結(jié)合蛋白（h-FABP）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。
活化素Aelisa試劑盒的測定步驟：
1、加樣
①除包被外都需45度加樣
?、诩訕芋w積要準(zhǔn)確
?、酃艿准訕樱荒芗釉诠鼙谏?/div>
?、芗訕訒r不能產(chǎn)生氣泡
2、溫浴
①加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫度的水浴箱。
?、诟鱁LISA板不應(yīng)疊在一起。
?、蹫楸苊庹舭l(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的金屬濕盒中。
?、芗尤氲孜锖?，反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便不時觀察，待對照管顯色適當(dāng)時，即可終止酶反應(yīng)。
3、洗滌
?、傧礈煸贓LISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
?、谀康氖窍慈シ磻?yīng)液中沒有與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4、讀板
①陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般可采用目視比色。
?、谌缬妹笜?biāo)儀測定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì)量和軟件的算法。
