歡迎訪問上海研生實業有限公司網站

返回首頁|聯系我們

全國統一服務熱線:

15201736385
技術文章您當前的位置:首頁 > 技術文章 > 探針法熒光定量PCR試劑盒實驗過程

探針法熒光定量PCR試劑盒實驗過程

日期:2023-10-09瀏覽:1494次

探針法熒光定量PCR試劑盒實驗過程:

一、試劑準備

1. DNA模板

2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5.Taq酶

二、操作步驟

1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。

    10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1(10pM)               2μl

      引物2(10PM)              2μ

      Taq酶(2U/μl)            1μl

      DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl

      加ddH2O至               50 μl

   視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。

2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,后在72℃ 保溫7min。

3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測


上一篇:痤瘡丙酸桿菌 血清/培養基菌種保藏方法

下一篇:進口ELISA試劑盒竟然應用于如此之多的范圍

在線客服 聯系方式 二維碼

服務熱線

021-59989018

掃一掃,關注我們

主站蜘蛛池模板: 激情内射日本一区二区三区| heyzo朝桐光在线播放| 麻豆亚洲AV成人无码久久精品 | 精品久久久久久中文| 成年人在线看片| 啊啊啊好大好爽视频| 中文字幕一精品亚洲无线一区| 色中色在线下载| 成年人性生活免费视频| 又爽又黄又无遮挡的视频在线观看| 中文织田真子中文字幕| 翁熄止痒婉艳隔壁老李头| 成人网视频免费播放| 午夜免费福利网站| www.天天操.com| 激情内射日本一区二区三区| 国产韩国精品一区二区三区久久| 亚洲熟女乱色一区二区三区| 91成人在线免费视频| 欧美性猛交xxxx乱大交极品| 国产精品久久久久一区二区| 亚州春色校园另类| 麻豆工作室传媒| 无码人妻精品一区二区三区久久| 啊~用力cao我cao烂我小婷| 一二三四日本高清社区5| 波多野结衣系列痴女| 国产精品拍拍拍| 久久桃花综合桃花七七网| 色情无码www视频无码区小黄鸭| 影音先锋男人站| 亚洲第一成年免费网站| 日日夜夜嗷嗷叫| 日本成人免费在线| 午夜无码国产理论在线| 99在线观看视频| 樱花草在线社区www韩国| 国产不卡视频一区二区三区| 一个人www免费看的视频| 欧美牲交a欧美牲交aⅴ免费下载 | 五月开心播播网|