歡迎訪問上海研生實業(yè)有限公司網(wǎng)站

返回首頁|聯(lián)系我們

全國統(tǒng)一服務(wù)熱線:

15201736385
技術(shù)文章您當前的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 探針法熒光定量PCR試劑盒實驗過程

探針法熒光定量PCR試劑盒實驗過程

日期:2023-10-09瀏覽:1246次

探針法熒光定量PCR試劑盒實驗過程:

一、試劑準備

1. DNA模板

2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5.Taq酶

二、操作步驟

1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

    10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1(10pM)               2μl

      引物2(10PM)              2μ

      Taq酶(2U/μl)            1μl

      DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl

      加ddH2O至               50 μl

   視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。

2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。

3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測


上一篇:痤瘡丙酸桿菌 血清/培養(yǎng)基菌種保藏方法

下一篇:進口ELISA試劑盒竟然應(yīng)用于如此之多的范圍

在線客服 聯(lián)系方式 二維碼

服務(wù)熱線

021-59989018

掃一掃,關(guān)注我們

主站蜘蛛池模板: 强奷乱码中文字幕| gay精牛cum| 高清不卡免费一区二区三区| 精品国精品国产自在久国产应用男 | 女人与狥交下配a级正在播放| 午夜激情小视频| 一区二区不卡久久精品| 国产浮力影院第一页| 月夜直播在线看片www| 国产欧美日韩在线观看无需安装| 你懂得视频在线观看| a级男女仿爱免费视频| 色天使亚洲综合一区二区| 无码国模国产在线观看免费| 国产99久久亚洲综合精品| 中国黄色免费网站| 精品不卡一区中文字幕| 夫妇交换性三中文字幕| 亚洲精品国产福利在线观看| 91老师国产黑色丝袜在线| 欧美孕交videosfree黑| 国产欧美一区二区精品久久久| 久久综合香蕉久久久久久久| 青柠直播视频在线观看网| 散步乳栓项圈尾巴乳环小说| 北条麻妃一区二区三区av高清 | 国产丰满岳乱妇在线观看| 中文字幕日韩一区二区三区不卡| 精品成人一区二区三区四区| 天天射天天干天天插| 亚洲欧洲专线一区| 成人自拍视频网| 无码国产福利av私拍| 公用玩物(np双xing总受)by单唯安| ffee性护士vihaos中国| 欧美在线看片a免费观看| 国产在线精品一区二区不卡麻豆 | caopon在线| 欧美性色欧美a在线播放| 国产女合集六超多超嫩部| 中文字幕丰满乱码|